革兰氏染色的注意事项（革兰氏染色有哪些注意事项）
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革兰氏染色的注意事项?
1、染色过程中勿使染色液干涸。用水冲洗后，应吸去玻片上的残水，以免染色液被稀释而影响染色效果。选用幼龄的细菌。G+菌培养12h-16h，E.coli培养24h。
2、选择活跃性较强的菌种、涂片不宜过厚等。革兰染色是对细菌进行分类的一种常用染色 *** ，为保证染色的质量，其注意事项为在进行革兰染色实验时，应选择活跃性较强的菌种，涂片不宜过厚，脱色要完全，不可不够或者过度等。
3、水洗：用水洗去涂片上的蕃红染色液。（11）晾干：将染好的涂片放空气中晾干或者用吸水纸吸干。（12）镜检：镜检时先用低倍，再用高倍，最后用油镜观察，并判断菌体的革兰氏染色反应性。
4、革兰氏染色的注意事项：革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。如脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性菌。
革兰氏染色的注意事项
1、染色过程中勿使染色液干涸。用水冲洗后，应吸去玻片上的残水，以免染色液被稀释而影响染色效果。选用幼龄的细菌。G+菌培养12h-16h，E.coli培养24h。
2、选择活跃性较强的菌种、涂片不宜过厚等。革兰染色是对细菌进行分类的一种常用染色 *** ，为保证染色的质量，其注意事项为在进行革兰染色实验时，应选择活跃性较强的菌种，涂片不宜过厚，脱色要完全，不可不够或者过度等。
3、染色过程中勿使染色液干涸.用水冲洗后，应吸去玻片上的残水，以免染色液被稀释而影响染色效果。选用幼龄的细菌.G+菌培养12h-16h，E.coli培养24h.若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应。
革兰氏染色涂片为什么要固定,固定时要注意什么问题
革兰氏染色涂片需要固定是为了防止菌体被冲走或吹走。在革兰氏染色的后续步骤中，需要用水洗，并用吹风机吹干，固定可以确保菌体在这些步骤中不会流失，从而保证染色的准确性和可靠性。
当细菌分解糖类产酸使培养基pH下降时，细菌所带正电荷增加，此时可用伊红、酸性复红或刚果红等酸性染料染色。革兰氏染色法将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性，是由这两类细菌细胞壁的结构和组成不同决定的。
革兰氏染色是一种细菌染色 *** ，通常包括涂片、干燥、固定和染色等步骤。其中，固定步骤一般采用加热固定或化学固定，而不是自然干燥。
以免水冲洗时易被充掉；2，使抹片易于着色或更好的着色；3，可杀死抹片中的微生物。注意：火焰固定时使涂抹面向上，其背面在酒精灯外焰上如钟摆样来回数次，同时不宜温度过高，以免破坏菌体的结构。
因为后面要用缓水流冲片，不固定的话会冲走。
怎样验证革兰氏染色的正确?
1、尽量采用革兰氏复染法，确定菌株为单一菌群。
2、在同一载玻片上两端，分别对已知的革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌和需要鉴定的未知杆菌进行革兰氏染色；同理，在另一载玻片上两端，分别对已知的革兰氏阴性菌大肠杆菌和需要鉴定的未知杆菌进行革兰氏染色。
3、革兰氏染色后，观察两边，大肠杆菌红色，金黄葡萄球菌紫色，中间的大肠杆菌红色；待测菌若与大肠杆菌一样颜色，就是阴性菌，是紫色就是阳性菌。
4、保证革兰氏染色实验结果可靠的 *** ：革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。如脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性菌。
5、被普遍采用的经Hucker氏改良的革兰氏染色法，其操作步骤为：制片→初染→媒染→脱色→复染→干燥→观察。
6、革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作 *** 是： 取载玻片用纱布擦干，载玻片的一面用marker笔画一个小圈（用来大致确定菌液滴的位置）。涂菌的部位在火焰上烤一下，除去油脂。
什么是革兰氏染色法?染色过程应注意什么
1、革兰氏染色属复染法，即将标本固定后，先用龙胆紫染色，加碘液媒染后用酒精脱色，再用稀释复红复染。染色后除可以看到细菌形态外，还可将细菌分为两大类，即不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌（G+）。
2、革兰氏染色法 不少于两种染料参与的染色 *** 称之为复染法，革兰氏染色法属于复染法类的一种染色 *** 。由结晶紫、碘液、番红参与，通过染料对细菌的细胞壁的着色，来区分革兰氏阴性菌与阳性菌的一种 *** 。
3、革兰氏染色法：1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立。革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G ）和革兰氏阴性菌（G-）两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。
2.哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性?其中最关键的环节是什么?
影响革兰氏染色结果的正确性的环节主要是涂片环节、加热固定环节、脱色环节；其中最关键的环节是脱色环节。被普遍采用的经Hucker氏改良的革兰氏染色法，其操作步骤为：制片→初染→媒染→脱色→复染→干燥→观察。
涂片环节：涂片过厚或细菌培养物培养时间过长都影响染色效果，涂片过厚会导致染色过程中细菌难以被充分着色，而细菌培养物培养时间过长则导致细菌细胞壁的通透性发生变化，从而影响染料的渗透和着色。
最主要的环节是酒精脱色。还有其他环节：制片时菌膜的厚度和细菌量是否太多、脱色时间是否适宜、稀释石炭酸复红的浓度及是否已有沉淀、加热固定时是否加热过度等。
影响因素 在实验中经常会出现假阳性和假阴性的结果，假阳性主要是由于脱色不完全，可能是由于涂片过厚，或者是结晶紫染色过度，导致脱色不完全。
革兰氏染色成败的关键是酒精脱色.如脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性菌.脱色时间的长短还受涂片厚薄及乙醇用量多少等因素的影响，难以严格规定。
脱色是革兰氏染色是否成功的关键，脱色不够造成假阳性，脱色过度造成假阴性；老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性，故应选用活跃生长期菌种染色；涂片过厚，脱色不完全造成假阳性。
文章到此结束，希望可以帮助到大家。
